이 계산기는?
PCR Master Mix 계산기는 다수의 샘플에 대해 PCR 반응을 준비할 때 필요한 시약(Buffer, dNTPs, Primer, Water, Enzyme)의 총량을 자동으로 계산해줍니다. 여분(Dead volume)을 고려한 계산으로 시약 부족 사태를 방지하세요.
Standard PCR (20µL 기준 예시):
- 10X Buffer: 2µL
- dNTP (10mM each): 0.4µL
- Forward / Reverse Primer (10µM): 각 1µL
- Taq Polymerase: 0.2µL
- Template DNA: 1µL
- DW (증류수): 14.4µL
qPCR SYBR Green (20µL 기준 예시):
- 2X SYBR Mix: 10µL
- Forward / Reverse Primer (10µM): 각 0.8µL
- Template: 2µL
- DW: 6.4µL
사용 공식:
총량 = (반응수 + 여분) × 1회 용량입력 변수 설명
반응 수 (Samples)
실험할 샘플의 개수입니다. Negative control과 Positive control도 포함하세요.
여분 (Dead volume)
피펫팅 오차나 튜브 벽면에 묻는 손실분을 보상하기 위한 여유분입니다. 보통 전체 반응 수의 10% 또는 +1~2 reaction을 추가합니다.
활용 예시
- 8개 샘플 + Control 2개 + 여분 1개 = 11회분 Master Mix 준비
- 96-well plate 실험: 100회분 + 10회분 여분 = 110회분 계산
💡 팁: Master Mix(Pre-mix)를 만들 때는 Template DNA를 제외한 모든 성분을 큰 튜브에 미리 섞은 뒤, 각 PCR 튜브에 분주하고 마지막에 DNA를 넣는 것이 파이펫팅 오차를 줄이는 비결입니다.
⚠️ 주의사항
- 효소(Polymerase)는 점성이 있는 글리세롤에 보관되므로 사용할 때 천천히 피펫팅하고, Master Mix에 넣은 후 충분히 섞이도록(Vortexing 후 Spin-down) 해주세요.
- 오염 방지를 위해 장갑을 착용하고, 피펫 팁은 자주 교체하세요.
💡 자주 묻는 질문
Q왜 여분(Extra)을 계산해야 하나요?
A
여러 번 나누어 담다 보면 피펫 팁에 묻거나 미세한 오차가 누적되어 마지막 샘플에 넣을 양이 부족해질 수 있습니다. 이를 방지하기 위해 10% 정도 넉넉하게 만듭니다.
QHot-start Taq Polymerase가 뭔가요?
A
상온에서는 효소 활성이 차단되어 있다가, PCR 초기 변성 단계(95°C)에서 활성화되는 효소입니다. 상온에서 비특이적 결합(Primer dimer 등)이 일어나는 것을 막아줍니다.
QMaster Mix는 얼음 위에서 만들어야 하나요?
A
네, 효소(Polymerase)는 온도에 민감하므로 항상 얼음(Ice) 위에서 작업하고, 사용 직전에 냉동실에서 꺼내는 것이 좋습니다.
왜 이 계산기가 필요한가요?
복잡한 수식을 직접 계산하는 것은 시간이 걸리고 실수가 발생하기 쉽습니다. LabMate의 결정론적 엔진은 검증된 알고리즘을 통해 0.0000000001의 오차도 없는 정확한 결과를 보장합니다.