이 계산기는?
DNA/RNA 정량 계산기는 UV 분광광도계(예: Nanodrop)로 측정한 260nm 흡광도(A260)를 이용하여 핵산의 농도를 계산합니다.
핵산은 260nm 파장에서 자외선(UV)을 흡수하는 성질이 있으며, 이 흡광도는 핵산의 농도에 비례합니다.
공식
농도(ng/µL) = A260 × Factor × Dilution Factor
Factor (핵산 종류별 환산 계수):
- dsDNA (이중나선 DNA): 50
- ssDNA (단일가닥 DNA): 33
- RNA: 40
- Oligo: 33
사용 공식:
a260 * factor * dilution입력 변수 설명
흡광도 (A260 Absorbance)
260nm 파장에서 측정한 흡광도 값입니다. Nanodrop이나 UV 분광광도계에서 직접 읽습니다. 정확한 측정을 위해 0.1-1.0 범위가 적합합니다.
핵산 타입 Factor
핵산 종류에 따른 환산 계수입니다. 이중나선 DNA는 50, RNA는 40, 단일가닥 DNA나 올리고뉴클레오타이드는 33을 사용합니다.
희석 배수 (Dilution Factor)
측정 전 시료를 희석한 경우의 배수입니다. 원액 그대로 측정하면 1, 10배 희석했다면 10을 입력합니다.
활용 예시
- A260=0.5인 dsDNA 원액: 농도 = 0.5 × 50 × 1 = 25 ng/µL
- A260=0.8인 RNA 10배 희석액: 농도 = 0.8 × 40 × 10 = 320 ng/µL
💡 팁: A260/A280 비율로 순도를 확인하세요. 순수한 DNA는 ~1.8, RNA는 ~2.0입니다. 단백질 오염 시 비율이 낮아집니다. 또한 A260/A230 비율로 유기 용매 오염 여부를 확인할 수 있습니다.
⚠️ 주의사항
- 측정 전 반드시 기기 블랭크(Blank) 설정을 정확히 수행하세요. 용매(DW, TE Buffer 등)와 동일한 용액을 써야 합니다.
- Nanodrop 사용 시 Pedestal(시료 닿는 부분)을 킴와이프 등으로 깨끗이 닦아 이전 샘플의 잔여물을 제거하세요.
💡 자주 묻는 질문
QA260/A280 비율이 중요한 이유는?
A
핵산의 단백질 오염 정도를 나타내는 지표입니다. DNA는 약 1.8, RNA는 약 2.0이 이상적입니다. 1.6 이하로 나오면 단백질이나 페놀 오염을 의심할 수 있습니다.
QA260/A230 비율은 무엇을 의미하나요?
A
염(Guanidine 등), 페놀, 에탄올 같은 유기 용매의 오염 여부를 나타냅니다. 보통 2.0-2.2 범위가 좋습니다. 이 값이 낮으면 정제 과정에서 세척(Washing)이 부족했다는 신호일 수 있습니다.
QDNA와 RNA의 Factor가 다른 이유는?
A
핵산의 종류와 구조(이중나선 vs 단일가닥)에 따라 자외선(UV) 흡수 효율(몰 흡광 계수)이 다르기 때문입니다. 이중나선 구조(dsDNA)가 단일가닥보다 빛을 덜 흡수합니다(Hypochromicity).
왜 이 계산기가 필요한가요?
복잡한 수식을 직접 계산하는 것은 시간이 걸리고 실수가 발생하기 쉽습니다. LabMate의 결정론적 엔진은 검증된 알고리즘을 통해 0.0000000001의 오차도 없는 정확한 결과를 보장합니다.